На базе КДЛ «Здоровье» г. Барнаула нами было исследовано 82 образца кала на дисбактериоз от пациентов с предварительными диагнозами: синдром раздраженного кишечника, синдром избыточного бактериального роста, иммунодефицит неясной этиологии, дивертикулит и др.

В качестве контрольной группы было исследовано 610 образцов кала от клинически здоровых людей, проходивших плановый медицинский осмотр.

Патологический материал засевался на среду Сабуро с 2% глюкозы и хлорамфениколом и инкубировался при 35 °С в течение 72 часов. Выросшие колонии пересевались на хромогенный агар (HiCrome™ Candida Differential Agar) для грибов Candida фирмы HiCrome (Индия) и инкубировались при 35 °С в течение 48 часов. Видовая принадлежность грибов оценивалась согласно рекомендациям производителя: C. albicans образует гладкие зеленые колонии, C. krusei – пурпурного цвета расплывчатые колонии, C. tropicalis – синие или синие с металлическим оттенком выпуклые колонии, C. glabrata – колонии от кремового до белого цветов.

Для более точной идентификации часть штаммов была идентифицирована при помощи масс-спектрометра Microflex производителя Bruker Daltonik GmbH & Co. KG (Германия), с уникальным программным обеспечением MALDI Biotyper, использующим референтскую базу данных (содержит более 2500 видов МО и 7800 штаммов).

Вычисление доверительных интервалов произведено с помощью программы GraphPad QuickCalc. Для определения доверительных интервалов использовался метод, разработанный Агрести и Куллом, который они называют модифицированным методом Вальда. 95% ДИ рассчитывается с использованием следующего уравнения:

Значения 2 и 4 на самом деле равны z2/2 и z2, где z – критическое значение из распределения Гаусса. Поскольку 95% всех значений нормального распределения лежат в пределах 1,96 стандартного отклонения от среднего, z = 1,96 (округляем до 2,0) для 95% доверительных интервалов.

На основе полученных данных (табл. 1) видно, что частота встречаемости грибов рода Candida в случае патологии желудочно-кишечного тракта (ЖКТ) более чем в 3 раза больше, чем у клинически здоровых людей, причем высеваемость различных видов неодинакова. Встречаемость Candida krusei в 5,8 раза выше в случае патологии ЖКТ, тогда как обнаружение Candida glabrata превышает норму лишь в 1,4 раза.

Другим важным моментом является то, что в среднем концентрация грибов в случае патологии 2,5 раза выше группы клинически здоровых людей (табл. 2).

Из данных таблицы 1 очевидно, что частота встречаемости дрожжей рода Candida у лиц с патологией ЖКТ более чем в три раза превышает их количество у лиц с отсутствием клинической симптоматики органов ЖКТ. Также отмечаются существенные отличия видового состава грибов в случае патологии кишечника по сравнению с контрольной группой. Так, частота встречаемости различных видов грибов рода Candida существенно отличается – от 1,4% Candida glabrata до 5,8% Candida krusei.

Другим аспектом, обнаруженным в ходе нашей работы, было отличие в концентрации микромицетов у группы пациентов с патологией ЖКТ в отличии от группы здоровых людей. Концентрация грибов в случае патологии кишечника 2,5 раза выше концентрации в контрольной группе, что делает важным количественное определение грибов кишечника.

Несмотря на то что Candida spp. вызывает более 400 000 системных микозов ежегодно [13] и является причиной 70% всех микозов человека [14], на сегодня исследованию грибкового компонента микрофлоры кишечника уделяется недостаточно внимания.

Грибы рода Candida обладают широким спектром факторов патогенности, основными из которых являются секретируемая аспартил-протеаза, фосфолипаза и гемолизин [15]. Способность Candida spp. формировать биопленку, где основным элементом внеклеточного матрикса являются 1,3-глюканы, способствует устойчивости к ряду антимикотических препаратов, блокируя их проникновение к клеткам грибов [13]. Более того, в условиях биопленки возникают гипоксические условия, активирующие гены метаболизма жирных кислот и эргостерола и др., что позволяет клеткам пережить голодание и окислительный стресс [11]. Еще одной, чрезвычайно важной особенностью грибов рода Candida является их способность к тигмотропизму – созданию биопленки на абиотических поверхностях с дальнейшим ее распространением в тканях организма хозяина [15]. Вышеописанные факторы являются лишь небольшой частью патогенетического потенциала грибов рода Candida, и, несмотря на наличие существенных достижений в диагностике и лечении кандидозов, данная патология до сих пор остается в списке наиболее встречающихся заболеваний человека.

Обнаружение достоверных отличий в частоте встречаемости грибов рода Candida у пациентов с патологией ЖКТ говорит о значимости данных микроорганизмов и требует большего внимания в диагностике патологи кишечника.

На сегодня различные виды грибов рода Candida рассматриваются как возможные этиологические агенты заболеваний ЖКТ и ряда внекишечных заболеваний. Показанные в нашей работе различия в частоте высеваемости различных видов могут свидетельствовать о недостаточности дородовой диагностике кандидозов.

Полученные в нашей работе данные требуют дальнейшего изучения, но выявление наиболее частой встречаемости Candida krusei предполагает более осторожное применение антимикотических препаратов группы триазолов (флуканазол, итраконазол) в связи с природной устойчивостью этого вида грибов рода Candida к данной группе препаратов.

Данные, полученные в нашем исследовании, показали существенные различия в частоте встречаемости грибов и видовом составе рода Candida у здоровых людей и у людей с патологией кишечника. Данные отличия в совокупности с новыми знаниями о биологии грибов рода Candida и их взаимоотношениях с организмом человека позволяют по-другому взглянуть на проблему кандидозов кишечника в их лечении и прогнозе.

Конфликт интересов: авторы декларируют отсутствие явных и потенциальных конфликтов интересов, связанных с публикацией настоящей статьи.

Источники финансирования: авторы заявляют о финансировании проведенного исследования из собственных средств.

Участие авторов:

Разработка концепции и дизайна – ПВВ, ВЮВ, СТВ

Сбор и обработка материала – ПВВ, ПЕА

Статистическая обработка – ПЕА

Написание текста – ПВВ

Редактирование – СТВ, ВЮВ