Видовое разнообразие микробиома конъюнктивы глаз у пациентов с синдромом сухого глаза

Синдром сухого глаза (ССГ) – одно из самых часто встречающихся хронических заболеваний глаз. По данным ряда авторов, количество пациентов офтальмологического профиля, которые обращаются с ССГ среди взрослого населения, варьирует от 18 до 67% [1-3]. В России точных данных о распространенности ССГ нет. Известными факторами риска развития ССГ считаются зрелый возраст, женский пол, низкий уровень андрогенов, курение, воздействие погодных условий (жара, холод, низкая влажность), офисная работа, связанная с длительными зрительными нагрузками за мониторами компьютеров, рефракционные операции, контактная коррекция, прием ряда препаратов (антидепрессантов, бета-блокаторов и др.), системные заболевания (синдром Шегрена, ревматоидный артрит, сахарный диабет и т. д.) [4][5].

Долгое время основной причиной развития ССГ считалось нарушение гомеостаза слезной пленки и глазной поверхности, также наличие системных заболеваний (болезни обмена веществ, аутоиммунные заболевания, гормональные расстройства и др.), приводящих к нарушению продукции и качественному изменению белкового, липидного и минерального состава слезной пленки, что приводит к нарушениям местного иммунитета и может вызывать развитие патогенной микробиоты и изменению микробиома глаз [2]. В настоящее время в мире активно изучается микробиом глаз, глазной поверхности в норме и при инфекционных заболеваниях [6-8]. Но при этом в диагностике ССГ не проводили исследование микробиома глазной поверхности.

Цель исследования: оценить видовой состав микроорганизмов конъюнктивы глаз у пациентов с ССГ, проживающих на территории Приморского края.

Материалы и методы

В исследовании приняли участие 229 пациентов офтальмологического профиля в Приморском крае в  возрасте 18–90 лет (среди них мужчин – 21,6%, женщин – 78,4%). Исследовали биоматериал из правого и левого глаз (мазки с конъюнктивы).

Пациенты отбирались по таким параметрам: 1) жалобы (сухость глаз, ощущение «песка» в глазах по утрам и в течение дня, слезотечение, вязкая слеза); 2)  тест Ширмера (все параметры от нормы до признаков недостаточности слезной жидкости); 3) тест Норна (ускоренное время разрыва слезной пленки, недостаточность липидного и муцинового слоев); 4) нарушение работы мейбомиевых желез; 5) отсутствие сопутствующих заболеваний. Они не носили контактные линзы и не имели историй болезни с системными и глазными заболеваниями, травмами/трансплантациями глаз и недавнего (в течение 3 месяцев) лечения антибиотиками.

Биоматериал отбирали с поверхности конъюнктивы в асептических условиях стерильным ватным тампоном. Исследование проводили классическим микробиологическим методом с использованием селективных питательных сред и хромогенных агаров. Идентификацию выделенных культур осуществляли с помощью масс-спектрометрического анализа (времяпролетная масс-спектрометрия с матрично-активированной лазерной десорбцией/ионизацией) (Autof ms 1000 MALDI-TOF, Autobio), что позволило ускорить получаемый результат, расширить видовой спектр получаемых изолятов.

Исследование одобрено Междисциплинарным комитетом по этике Тихоокеанского государственного медицинского университета (Протокол № 4 от  18.12.2023 г.). Информированное согласие на участие в исследовании получено от всех пациентов. Информация о пациентах включала пол, возраст, общее состояние здоровья и состояние здоровья глаз.

Результаты исследования

За период 2023–2025 гг. исследованы пробы биологического материала от 229 пациентов. Положительные результаты были выявлены у 154 человек (67,25%). По возрастному признаку чаще с ССГ обращались пациенты от 60 до 74 лет (43,11%), реже – в возрасте от 18–24 лет (3,8%) и лица старше 90 лет (1,9%). Среди пациентов с положительным результатом чаще встречались женщины (74,67%), чем мужчины (25,33%).

При исследовании биоматериала, полученного с поверхности конъюнктивы глаз пациентов с ССГ, выделены микроорганизмы, относящиеся к 10 родам: Staphylococcus, Corynebacterium, Streptococcus, Bacillus, Enterococcus, Kocuria, Arthrobacter, Escherichia, Acinetobacter, Moraxella (табл. 1).

Среди полученных изолятов грамположительные микроорганизмы составили 97,3%, грамотрицательные – 2,7%. Видовой состав выделенных микроорганизмов (МКО) представлен в таблице 1. Все эти микроорганизмы выделялись в монокультуре.

Важно отметить, что большинство культур (80,18%) выделялись в диагностическом титре 10¹–10³ КОЕ/тампон, а 19,82% изолятов – в титрах 10⁴ КОЕ/тампон (S. epidermidis, S. aureus, S. lugdunensis, St. viridans, E. faecalis, Kocuria marina) и 10⁵ КОЕ/тампон (S. epidermidis, S. aureus, S. haemolyticus, S. hominis, St. oralis, E. coli).

Как показали результаты исследований, лидирующие позиции среди выявленных микроорганизмов занимали бактерии, принадлежащие к роду Staphylococcus, представленные 10 видами (табл. 1). Среди них коагулазонегативные стафилококки составляли 88,9%, коагулазоположительные – S. aureus – 11,1%.

На втором месте по частоте выявления были Corynebacterium sp. (7.4%) – 3 вида, среди которых преобладал Corynebacterium macginleyi (табл. 1). Остальные МКО изолировались в единичных случаях.

Кроме выделения микроорганизмов в монокультуре у пациентов с ССГ встречались и их ассоциации (табл. 2). В период с 2023 по 2025 год у пациентов с ССГ выявлено 6 микробных ассоциаций (6,7%) (табл. 2). По возрастному признаку большинство ассоциаций выделялись от пациентов в возрасте 60–74 лет.

Частота выявления ассоциаций была небольшая (6,7%), в состав ассоциаций входили известные глазные патогены, принадлежащие к 3 родам – Staphylococcus, Corynebacterium, Arthrobacter. Все эти микроорганизмы (кроме S. aureus) были изолированы в низких титрах.

Обсуждение полученных данных

В последнее время возрос интерес многих исследователей к изучению микробиома глаз, особенно конъюнктивальной полости, в норме и при различных патологиях. Ученые пытаются найти связь между наличием определенных микроорганизмов и развитием инфекционных и/или других патологических процессов в глазах [4, 6, 7]. Установлено, что в конъюнктивальной полости здорового человека может встречаться нормальная микробиота (чаще она стабильна, но видовой состав может быть разнообразен и повторять микробиом кожи человека), либо она отсутствует в силу бактерицидных свойств слезной жидкости. Разнообразные факторы окружающей среды, пол, возраст, диета, особенности профессиональной деятельности, использование контактных линз, прием антибиотиков, различные системные заболевания приводят к нарушению продукции и качественному изменению состава слезной пленки, что способствует изменению местного иммунитета и может вызывать развитие патогенной микробиоты и изменению микробиома глаз [2, 7, 8]. ССГ в последнее время приобретает все большую актуальность, поэтому знание особенностей микробиома глаза при данной патологии становится очень важным.

В ходе нашего исследования был определен микробиом конъюнктивальной поверхности глаз у пациентов с ССГ, проживающих на территории Приморского края. У обследованных пациентов выделены микроорганизмы, относящиеся к 10 родам: Staphylococcus, Corynebacterium, Streptococcus, Bacillus, Enterococcus, Kocuria, Arthrobacter, Escherichia, Acinetobacter, Moraxella. Доминирующие позиции среди выявленных микроорганизмов занимали бактерии, принадлежащие к роду Staphylococcus, представленные 10 видами (S. epidermidis, S. aureus, S. haemolyticus, S. hominis, S. lugdunensis, S.  capitis, S. warneri, S. saprophyticus, S. auricularis, S. caprae). При этом коагулазонегативные стафилококки превалировали (88,9%). Полученные результаты совпадают с данными литературы по микробиологическим исследованиям, где отмечается, что комменсальная бактериальная популяция глазной поверхности доминирует среди грамположительных видов Staphylococcus, Corynebacterium и Streptococcus.

Интересны данные о выявлении S. auricularis с конъюнктивы глаза у пациента с ССГ. Эти стафилококки повсеместно распространены в природе, но в основном являются частью здоровой микробиоты наружного слухового прохода человека, колонизируя исключительно эту область, и способны вызвать инфекцию у людей с ослабленным иммунитетом [10].

Вторыми по частоте выявления были бактерии рода Corynebacterium. Среди трех видов коринебактерий преобладал С. macginleyi, который ранее считался непатогенным видом. Однако в последнее время исследователи отмечают риск развития глазных инфекций, вызванных этим видом коринебактерий, у пациентов с ослабленным иммунитетом [11][12]. Хотя патогенность C. macginleyi еще не подтверждена, возможно, и этот микроорганизм может быть потенциальной причиной развития ССГ.

В ходе исследований было выявлено 6 микробных ассоциаций, чаще выявляемых у S. epidermidis и C. macginleyi. Эти данные показывают их значение в офтальмологической практике при диагностике ССГ и требуют пристального внимания и глубокого изучения со стороны лечащих врачей и специалистов в области медицинской микробиологии для правильной диагностики офтальмопатологии и коррекции антимикробной терапии.

Выводы

Таким образом, наше исследование отмечает наличие разнообразного бактериального сообщества при ССГ у пациентов, проживающих на территории Приморского края. Оно представлено относительно небольшим числом основных родов МКО, но содержит значительную долю известных патогенов, хотя и в незначительном диагностическом титре. Кроме того, расшифровка микробных сообществ на поверхности конъюнктивы глаза может дать новое представление в формировании патологии поверхности глаза при ССГ.