Роль полиморфизма генов MTHFR, MTR, MTRR, FUT2 в риске развития синдрома поликистозных яичников

Синдром поликистозных яичников (СПКЯ) рассматривается как гетерогенное расстройство, проявляющееся нарушением менструального цикла, гиперандрогенией, олиго- или ановуляцией и поликистозными яичниками [1][2]. Вовлечение генов фолатного цикла в патогенез СПКЯ активно изучается в последние годы [2–5]. У пациенток с СПКЯ в три раза чаще встречается гипергомоцистеинемия, являющаяся фактором риска сердечно-сосудистой патологии. При повышении гомоцистеина происходит повышение экспрессии провоспалительных цитокинов, активация апоптоза и дефектного метилирования, что ухудшает пролиферацию и дифференцировку клеток гранулезы, нарушая фолликулогенез, стероидогенез в яичниках [6][7]. Ген MTHFR кодирует метилентетрагидрофолатредуктазу, фермент фолатного цикла, который играет ключевую роль в метаболизме фолиевой кислоты, метилировании ДНК и белков [8].

Мутации в гене MTHFR являются наиболее распространенной причиной генетического повышения гомоцистеина [2][5]. Дефекты фолатного цикла приводят к гипергомоцистеинемии, что при СПКЯ может способствовать нарушению имплантации, ухудшению кровотока эндометрия, увеличивается риск неблагоприятных исходов беременности [9]. Выявлена генетическая предрасположенность, влияющая на уровень гомоцистеина, фолиевой кислоты и витамина В₁₂ [10][11][12]. При исследовании генотипов MTHFR C677T, MTR A66G (метионинсинтаза), MTRR A2756G (метионинсинтаза редуктаза) в азиатской популяции выявлена взаимосвязь с риском СПКЯ [3][4][5][13][14] Обнаружена также взаимосвязь между генотипом A/A FUT2 rs 602662 (α-1,2-фукозилтрансфераза) и нормальным индексом массы тела (ИМТ) и лучшими метаболическими показателями, чем при выявлении генотипа G/G и A/G FUT2 rs602662 [10], генотип G/G и A/G характеризовался более низким уровнем витамина В₁₂ [10].

Исследование мутаций в вышеобозначенных генах весьма актуально для решения репродуктивных задач в ближайшее время и профилактики сердечно-сосудистых, когнитивных нарушений в долгосрочной перспективе у женщин с СПКЯ [3][4][6][8][9][10].

Цель исследования состояла в изучении частоты встречаемости и влиянии полиморфизма генов MTHFR rs1801133, MTR rs1805087, MTRR rs1801394, FUT2 rs602662 на содержание в крови гомоцистеина, фолиевой кислоты, витамина В₁₂ и связи данных маркеров с риском развития синдрома поликистозных яичников.

Материалы и методы

Исследование одобрено Междисциплинарным этическим комитетом ФГБОУ ВО ТГМУ Минздрава России (протокол № 9 от 16.05.2022 г.). Исследование проводилось с 2022 по 2024 г. на базах Краевой клинической больницы № 2 и медицинского центра «Пластэк Хирургия». Обследовано 136 пациенток с СПКЯ (ИМТ 27,37 ± 5,76 кг/м²) и 117 здоровых женщин из группы контроля (ИМТ 23,04 ± 1,71 кг/м²). Средний возраст пациенток с СПКЯ составлял 34,48 ± 0,58 года, средний возраст здоровых женщин – 31,48 ± 0,63 года. Пациентки из всех групп не беременные, не имели острых и хронических заболеваний в фазе обострения, не злоупотребляли алкоголем и курением. Принцип формирования групп – параллельный, открытый, стратифицированный.

Для исследования уровней фолиевой кислоты, витамина В₁₂, гомоцистеина в сыворотке крови применялся иммунохемилюминесцентный метод с использованием парамагнитных частиц (анализатор DxI800, Beckman Coulter). Для генотипирования использовался буккальный соскоб эпителия, исследование проводилось методом полимеразной цепной реакции (ПЦР) в режиме реального времени на приборной базе ДНК-амплификатора Bio-Rad CFX96 (г. Новосибирск, ООО «Базис Генотех»). Исследовались полиморфизмы генов MTHFR rs1801133, MTR rs1805087, MTRR rs1801394, FUT2 rs602662.

Статистический анализ проводился с использованием программы StatTech v. 4.7.0 (разработчик – ООО «Статтех», Россия). Количественные показатели оценивались на предмет соответствия нормальному распределению с помощью критерия Колмогорова – Смирнова. Количественные данные описывались с помощью медианы (Me) и нижнего и верхнего квартилей (Q1–Q3). Категориальные данные описывались с указанием абсолютных значений и процентных долей. 95% (ДИ) доверительные интервалы для процентных долей рассчитывались по методу Клоппера – Пирсона. Наблюдаемые и ожидаемые числа каждого генотипа для пациенток и здоровых женщин сравнивались в равновесии с использованием критерия χ², критерия Фишера. Результаты представлены в виде отношения шансов (ОШ) и 95% ДИ для ОШ. Направление и теснота корреляционной связи между двумя количественными показателями оценивались с помощью коэффициента ранговой корреляции Спирмена. Прогностическая модель, характеризующая зависимость количественной переменной от факторов, разрабатывалась с помощью метода линейной регрессии. Различия считались статистически значимыми при p < 0,05.

Результаты исследования

При проведении обследования выявлены различия показателей гомоцистеина, фолиевой кислоты и витамина В₁₂ у пациенток с СПКЯ и группой контроля (табл. 1).

Показатели фолиевой кислоты, витамина В₁₂, гомоцистеина в группе пациенток с СПКЯ и группе контроля достоверно значимо отличались (p < 0,05). При оценке корреляционной связи ИМТ и гомоцистеина у пациенток с СПКЯ была установлена прямая слабая связь (r = 0,196, p < 0,022). При увеличении гомоцистеина на 1 мкмоль/л следует ожидать увеличение ИМТ на 0,625 кг/см2. Полученная модель объясняет 3,0% наблюдаемой дисперсии ИМТ. При исследовании остальных параметров эта взаимосвязь не выявлялась.

При исследовании полиморфного маркера rs1801133 гена MTHFR установлено, что генотип Т/Т достоверно чаще встречается у пациенток с СПКЯ относительно здоровых женщин (ОШ = 3,77, ДИ = 1,477–9,60) и может увеличивать риск развития СПКЯ в 3,77 раза (табл. 2).

При анализе уровня гомоцистеина в зависимости от генотипов MTHFR rs1801133 выявлены существенные различия (p = 0,007) (по критерию Краскела – Уоллиса), при носительстве Т/Т у пациенток с СПКЯ уровень гомоцистеина был выше, чем при носительстве С/Т и С/С (табл. 3).

При исследовании полиморфного маркера rs1801394 гена MTRR генотип A/A достоверно чаще встречается у здоровых женщин, ОШ 0,57, ДИ (0,7–1,93). Выявлено, что носительство генотипа G/G у пациенток с СПКЯ встречается достоверно чаще в сравнении с группой здоровых женщин ОШ 1,94, ДИ (1 до 3,76) и может увеличить риск развития СПКЯ в 1,94 раза (табл. 2).

Обнаружены достоверные различия между пациентками с СПКЯ и группой контроля при носительстве гетерозиготного генотипа A/G MTR rs1805087, ОШ 2,23, ДИ (от 1,31 до 3,77), что может увеличить риск СПКЯ в 2,23 раза.

При анализе полиморфизма гена FUT2 rs602662 выявлено, что в группе контроля и у пациенток с СПКЯ содержится малое количество протективного генотипа А/А. Не выявлено достоверных различий в носительстве генотипов FUT2 rs602662 между пациентками с СПКЯ и здоровыми женщинами. При анализе гомоцистеина в зависимости от генотипов MTR, MTRR и FUT2 у пациенток с СПКЯ и здоровых не выявлено статистически значимых различий.

Обсуждение полученных результатов

Выявленные различия показателей фолиевой кислоты, витамина В₁₂ и гомоцистеина в сыворотке крови у пациенток с СПКЯ и здоровых женщин согласуется с данными литературы [1][5][6][7][9]. Повышение ИМТ и гомоцистеина у пациенток с СПКЯ и прямая корреляция этих маркеров позволяют относить их к модифицируемым факторам риска, так как повышенный уровень гомоцистеина у пациенток с СПКЯ влияет на имплантацию и исход беременности [9], а также является фактором риска сердечно-сосудистых заболеваний [1].

Преобладание генотипа Т/Т MTHFR rs1801133 у пациенток с СПКЯ и более высокий уровень гомоцистеина при носительстве Т/Т может быть фактором риска СПКЯ и ухудшать в дальнейшем течение заболевания, что требует не только предгравидарной подготовки, но и коррекции образа жизни и нутритивной поддержки. В ранее проведенных исследованиях [4][5][13][14] указывалось, что аллель Т в полиморфизме MTHFR C677T может быть фактором риска, особенно в азиатской популяции. Однако другие данные указывают на отсутствие различий в распределении генотипов MTHFR у пациенток с СПКЯ и здоровых женщин [5]. Вариант гена MTHFR rs1801133 включает Т/Т – гомозиготное патологическое носительство, C/Т – гетерозиготное патологическое носительство, C/C – гомозиготное протективное носительство [5][8]. Превалирование генотипа G/G в гене MTRR rs1801394 у пациенток с СПКЯ увеличивает риск развития СПКЯ. Подобная взаимосвязь с СПКЯ также установлена для MTRR A66G [3]. При этом нами подтверждено доминирование генотипа A/A MTRR rs1801394 у здоровых женщин, который можно рассматривать как протективный фактор.

Вариант гена MTRR rs1801394 G/G – гомозиготное патологическое носительство, A/G – гетерозиготное патологическое носительство, а вариант A/A – гомозиготное протективное носительство [3]. Выявленная нами связь генотипа A/G MTR rs1805087 может увеличивать риск развития СПКЯ в 2,23 раза. Однако ранее не было выявлено связи между MTR rs1805087 и риском СПКЯ [4]. Вариант гена MTR rs1805087 G/G – гомозиготное патологическое носительство, A/G – гетерозиготное патологическое носительство, A/A – гомозиготное протективное носительство [4][8]. При исследовании полиморфизма FUT2 нами не было установлено связи с риском развития СПКЯ. В ранее проведенных исследованиях выявлена связь между более низким уровнем витамина В₁₂ и носительством G/G и A/G FUT2 rs602662 [10]. Вариант гена FUT2 rs602662 G/G – гомозиготное патологическое носительство, A/G – гетерозиготное патологическое носительство, A/A – гомозиготное протективное носительство [10].

Вовлечение витамина В₁₂ в качестве ко- фактора в реакции превращения гомоцистеина в метионин необходимо учитывать при назначении бигуанидов, так как пациентки с СПКЯ входят в группу риска по развитию нарушения углеводного обмена. Согласно клиническим рекомендациям в терапию 2-й линии СПКЯ при противопоказаниях к назначению контрацептивов назначается метформин, что может снижать уровень витамина В₁₂, особенно у пациенток, имеющих генетическую предрасположенность к данной патологии [11][12].

Выводы

1. При исследовании генов фолатного цикла у женщин с СПКЯ и здоровых женщин выявлено, что риск развития СПКЯ сопряжен с генотипами Т/Т MTHFR rs1801133, A/G MTR rs1805087, G/G MTRR rs1801394.
2. Выявлена прямая корреляция между ИМТ и уровнем гомоцистеина у пациенток с СПКЯ.
3. Вариант генотипа A/A MTRR rs1801394 достоверно чаще встречается у здоровых женщин в сравнении с пациентками с поликистозом яичников, что значимо повышает его протективную роль от развития данной патологии.

Конфликт интересов: авторы декларируют отсутствие явных и потенциальных конфликтов интересов, связанных с публикацией настоящей статьи.

Источник финансирования: авторы заявляют о финансировании проведенного исследования из собственных средств.

Участие авторов:

Концепция и дизайн исследования – ОВВ, ВВЗ, ЕВМ

Сбор и обработка материала – ОВВ, НСЧ, ТАН

Статистическая обработка – ОВВ, НСЧ, ТАН

Написание текста – ОВВ, ВВЗ, НСЧ, ТАН

Редактирование – ЕВМ, ВВЗ